通用設(shè)備
專用設(shè)備
檢測(cè)分析設(shè)備
醫(yī)療器械I/II類
辦公及電子產(chǎn)品
室驗(yàn)用試劑耗材
工業(yè)生產(chǎn)原材料010-51282213
北京賽百奧科技有限公司
北京市海淀區(qū)亮甲店130號(hào)華玉大廈505室
989203@qq.com
營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩表現(xiàn)為代謝譜的變化和胰島素敏感度的損傷。早期以靜態(tài)培養(yǎng)方式為基礎(chǔ)的體外研究只能提供單個(gè)細(xì)胞中單分子途徑的大量信息，盡管已經(jīng)在局部細(xì)胞水平上對(duì)穩(wěn)態(tài)、炎癥和損傷的信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制進(jìn)行了充分的研究，但不能用于研究單個(gè)細(xì)胞或組織的變化信號(hào)是如何傳達(dá)給身體的其他部位，不同組織之間的cross-talk如何決定全身代謝水平。
以QV500流動(dòng)細(xì)胞培養(yǎng)為基礎(chǔ)建立的三維脂肪組織+內(nèi)皮細(xì)胞+肝細(xì)胞（AT+EC+HEP）流動(dòng)培養(yǎng)法通過(guò)培養(yǎng)基的流動(dòng)經(jīng)串聯(lián)培養(yǎng)室連接起來(lái)，以模擬血液連接身體中的不同組織或器官。
此流動(dòng)培養(yǎng)模型通過(guò)為細(xì)胞及時(shí)補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、增加供氧量，并且還能為細(xì)胞提供由培養(yǎng)基的流動(dòng)和細(xì)胞的crosstalk產(chǎn)生的間質(zhì)樣剪切應(yīng)力來(lái)維持高的細(xì)胞活力，在體外系統(tǒng)地重建內(nèi)源代謝，是研究不同位置的許多關(guān)鍵器官的具體功能和如何通過(guò)器官之間的相互作用來(lái)維持全身能量平衡的有力工具。
(Iori, E., et al. Glucose and Fatty Acid Metabolism in a 3 Tissue In-Vitro Model Challenged with Normo- and Hyperglycaemia. PLoS ONE. 2012; 7: e34704; Vozzi, F., et al. A flexible bioreactor system for constructing in vitro tissue and organ models. Biotechnol Bioeng. 2011; 108: 2129–2140)
圖 1 三維脂肪組織+內(nèi)皮細(xì)胞+肝細(xì)胞（AT+EC+HEP）流動(dòng)培養(yǎng)法的示意圖。Quasi Vivo 生物反應(yīng)器 (QV500) 培養(yǎng)肝細(xì)胞和脂肪組織用低剪切的培養(yǎng)室，而用于內(nèi)皮細(xì)胞的層流室（LFC）采用的是高剪切。
圖2. 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)用的高剪切層流室（LFC）(A) LFC設(shè)計(jì)圖。(B)組裝入流動(dòng)培養(yǎng)反應(yīng)器中的LFC， 本圖中采用的是Quasi Vivo流動(dòng)培養(yǎng)系統(tǒng)的原型機(jī)(Vozzi, 2011)。
圖3. 目前商品化的QV500流動(dòng)培養(yǎng)系統(tǒng)操作更簡(jiǎn)單，使用更方便。適合低通量的實(shí)驗(yàn)。
圖 4. 流動(dòng)培養(yǎng)的三維-脂肪組織+內(nèi)皮細(xì)胞+肝細(xì)胞（AT+EC+HEP）能更好的維持代謝物的穩(wěn)態(tài)平衡。與二維-脂肪組織+內(nèi)皮細(xì)胞（AT+EC）相比，流動(dòng)培養(yǎng)的三維-脂肪組織+內(nèi)皮細(xì)胞+肝細(xì)胞（AT+EC+HEP）的葡萄糖，甘油和游離脂肪酸的水平在48 h內(nèi)沒(méi)有變化，而白蛋白的合成以及乳酸和L-丙氨酸的釋放有所增加。GLU（葡萄糖），GLY（甘油），LAC（乳酸鹽），ALA（L-丙氨酸），E-SEL（E-選擇素）FFA（游離脂肪酸）。
圖 5 Quasi Vivo流動(dòng)培養(yǎng)系統(tǒng)可以輕松取出舊培養(yǎng)基進(jìn)行分析或補(bǔ)充新的培養(yǎng)基，在不同條件下進(jìn)行長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)而不會(huì)干擾細(xì)胞。適合同一細(xì)胞樣品的多時(shí)間點(diǎn)連續(xù)取樣。
圖6.流動(dòng)培養(yǎng)的三維-脂肪組織+內(nèi)皮細(xì)胞+肝細(xì)胞（AT+EC+HEP）模型能充分揭示葡萄糖過(guò)量和胰島素不足導(dǎo)致的體外模型的總體平衡或體內(nèi)穩(wěn)態(tài)失衡，如何誘導(dǎo)一般的和特定的內(nèi)皮應(yīng)激的。FS（饑餓，培養(yǎng)基中含5.5 mM葡萄糖）PARS（血糖穩(wěn)定狀態(tài)，培養(yǎng)基中含5.5 mM葡萄糖和65 pM胰島素）D1（I型糖尿病模型，培養(yǎng)基中含20 mM葡萄糖）D2（II型糖尿病模型，培養(yǎng)基中含20 mM葡萄糖和65 pM胰島素）。
總結(jié)
為模擬肝、脂肪組織和內(nèi)皮在機(jī)體內(nèi)的不同占比，流動(dòng)培養(yǎng)48 h后肝細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞終濃度應(yīng)為10:2:1。流動(dòng)培養(yǎng)時(shí)，肝細(xì)胞采用含有3 D支架的培養(yǎng)室，內(nèi)皮細(xì)胞采用層流室。培養(yǎng)基的流速為250 mL/min。
Quasi Vivo流動(dòng)培養(yǎng)系統(tǒng)，作為英國(guó)Kirkstall公司核心產(chǎn)品，10年來(lái)已在全球70+實(shí)驗(yàn)室使用，成功用于包括呼吸系統(tǒng)（研究熱點(diǎn)）、心血管、肝臟、腎臟、腸道、血腦屏障和腦組織類器官等各類細(xì)胞模型中。
購(gòu)物車
微信掃碼
在線客服
售前咨詢 
用戶中心
熱線電話
購(gòu)物車