阻抗式無標(biāo)記、非侵入實時細(xì)胞監(jiān)測系統(tǒng) 由美國AXION公司生產(chǎn)并提供,國內(nèi)樣機(jī)可預(yù)約試用!
Maestro Z的工作原理
細(xì)胞樣本生長在埋入于多孔板底部的電極之上。通過檢測阻抗值的變化,MaestroZ平臺能夠?qū)⒓?xì)胞的存在進(jìn)行量化。測試時,我們將微小的電信號施加于電極上。當(dāng)細(xì)胞貼附于電極并伸展開后,細(xì)胞間形成的聯(lián)接將會阻擋住這些電信號的通過,導(dǎo)致阻抗值的讀數(shù)增加。另外,一些細(xì)胞結(jié)構(gòu)形態(tài)上的細(xì)微改變(比如源于受體介導(dǎo)的信號傳遞或細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化)也會影響到阻抗值。阻抗檢測的無標(biāo)記和非侵入特性,使得我們的技術(shù)特別適合被用來定量細(xì)胞的動態(tài)反應(yīng),無論您想持續(xù)觀察多久。
阻抗檢測會計算有多少電信號(上圖中青色箭頭所示)被電極-細(xì)胞的界面所阻擋。當(dāng)電極末被覆蓋時,電信號能夠輕松穿過,這時阻抗值比較低。當(dāng)細(xì)胞蓋住電極時,能夠通過的電信號就變少了,相應(yīng)的阻抗值就會增大。當(dāng)細(xì)胞死亡或者脫離電極時,阻抗就會恢復(fù)到基線水平。
MAESTRO Z 應(yīng)用案例
您的細(xì)胞樣本專屬功能檔案
基于各自不同的生物學(xué)功能,細(xì)胞樣本間的生長、貼附及互作會有所不同。這些特性共同構(gòu)成了一個獨特的細(xì)胞檔案。Maestro Z使您得以記錄這些信息,并基于細(xì)胞各種特性(如種類、密度、形態(tài)和貼附)的不同來將它們分開歸檔。細(xì)胞功能歸檔可被用于細(xì)胞質(zhì)控、純度分析、量化生產(chǎn)速率和優(yōu)化實驗啟動時間點等方面。這些功能的實現(xiàn)無需復(fù)雜的實驗設(shè)定和分析。只需一個按鍵,Maestro Z系統(tǒng)就能穩(wěn)定測試環(huán)境,使您能夠長時間非侵入地監(jiān)測細(xì)胞,并提供實時的生長區(qū)曲線和簡明的終點圖示。
我們將Hela細(xì)胞按照不同密度種入Cytoview-Z測試板內(nèi),并對其貼附、伸展及增殖的不同生長階段開展監(jiān)測。從上方最左邊的圖中我們可以看到對應(yīng)于這些階段的實時阻抗記錄。其中任意時間的終點數(shù)據(jù)(如第16個小時)都可以以柱狀圖的形式單獨表示出來(中圖)。而從右側(cè)的圖示上我們可以看出Hela、
A549、和Calu-3這三種不同的細(xì)胞生長曲線都不盡相同。
追蹤免疫介導(dǎo)細(xì)胞死亡
神經(jīng)膠質(zhì)瘤是一種惡性腦腫瘤目前并無有效治療方案,預(yù)后生存期也只有12-15個月。而人體免疫系統(tǒng)中的效應(yīng)細(xì)跑,有著高特異性和固有的細(xì)胞毒性、在未來的腦膠質(zhì)瘤治療中被人們奇予很高的期望。Maestro Z的阻抗測試有著高靈敏、無標(biāo)記及無損的特點,為連續(xù)監(jiān)控腫瘤細(xì)胞增殖和免疫細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性提供了可能性。因此能夠被用來評估免疫治療的效價。
如上左圖所示,我們將惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株U87MG,以三種不同的細(xì)胞密度及四重復(fù)的形式,分成12個樣本種到CytoView-Z阻抗板內(nèi)。使用Maestro Z對其阻抗值變化持續(xù)監(jiān)測24小時后,以10:1的比例將被激活的人T細(xì)胞加入到這些樣本孔內(nèi),后續(xù)的確能夠觀察到阻抗值的降低。這和預(yù)期中的T細(xì)胞介導(dǎo)的U87細(xì)胞裂解效應(yīng)是一致的。對比之下,那些未經(jīng)處理的腫瘤細(xì)胞樣本(淺藍(lán)色顯示),其同時段測得的阻抗值則繼續(xù)上升。
上中圖則顯示了在這三種處理條件下(不同的細(xì)胞數(shù)量),檢測到的的實時細(xì)胞裂解比例。在這基礎(chǔ)上,我們就能如上右圖所示,對每種處理方案的KT50(裂解50%腫瘤細(xì)胞所需時間)值進(jìn)行計算??梢钥捶?,要達(dá)到更快的U87MG細(xì)胞殺傷速度,我們就需要更高的T細(xì)胞密度。
細(xì)胞毒性的動態(tài)研究
當(dāng)您想要測試新藥或者細(xì)胞治療的效果時,傳統(tǒng)的終點法實驗只能區(qū)分細(xì)胞樣本的死活,而無法了解細(xì)胞反應(yīng)的動態(tài)過程并對背后的機(jī)理做出解釋。Maestro Z所提供的無標(biāo)記、非侵入的連續(xù)監(jiān)控能力,就使您得以捕捉到細(xì)胞毒性的全程。不僅能看到毒性的程度,還能揭示其動態(tài)學(xué)和細(xì)胞死亡的速率。通過這些細(xì)胞反應(yīng)的動態(tài)表現(xiàn),您往往更能洞悉一個藥物的效力及機(jī)理。
用Doxorubicin藥物處理A549細(xì)胞后,阻抗測試揭示了樣本的動態(tài)反應(yīng)(上左圖為實時連續(xù)檢測結(jié)果,中圖為虛線處單個時間點的讀數(shù))。在同一塊板上,我們可以將Dox藥物處理組的阻抗數(shù)據(jù)和細(xì)胞生長組(未加藥對照)及細(xì)胞死亡組(加入Tergazymel)的相關(guān)數(shù)據(jù)做比對,從而得知Dox藥物導(dǎo)致細(xì)胞溶解比例的實時效應(yīng),并能夠覆蓋藥物反應(yīng)的整個過程。
感知受體介導(dǎo)的快速信號傳導(dǎo)
經(jīng)由信號傳導(dǎo)通路,細(xì)胞能夠接收外界的信息。胞外信號分子與細(xì)胞表面的對應(yīng)受體結(jié)合后,細(xì)胞內(nèi)的信號傳導(dǎo)就會被觸發(fā),并最終決定細(xì)胞的行為??缒な荏w中的最大家族是G蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs)。被結(jié)合后,它們將導(dǎo)致細(xì)胞構(gòu)象的改變并引起下游的一系列反應(yīng)。這些細(xì)微的變化通常發(fā)生迅速,但其對細(xì)跑生理的重大影響卻能夠持續(xù)幾分鐘至幾個小時。通過阻抗檢測,我們能夠?qū)⑵洳东@并量化。Moestro Z的高靈敏度及連續(xù)監(jiān)測特性賦予您測試細(xì)胞信號傳導(dǎo)動態(tài)的能力,無論這個過程有多久。
如上左圖所示,我們將Calu-3細(xì)胞培養(yǎng)在阻抗檢測板中,隨后加入不同濃度的異丙腎上腺素(一種強(qiáng)效β腎上腺素受體拮抗劑,圖中青色所示)并觀察阻抗值的實時變化。如果我們將20分鐘時間點的數(shù)據(jù)做成柱狀圖(如中圖所示),可以看到最高藥物濃度組的阻抗值在那時已經(jīng)降到了最低,而最低藥物濃度組則已經(jīng)回復(fù)到了基線值。我們還可以探索不同機(jī)理的化合物對于細(xì)胞信號傳導(dǎo)的不同作用。如右圖所示,橘色標(biāo)識的組胺處理組(100μM)很迅速地出現(xiàn)了短時間的阻抗值降低;而灰色標(biāo)識的細(xì)胞松弛素處理組,由于其細(xì)胞周期停止及肌動蛋白合成受抑制,則表現(xiàn)出前高后低的阻抗變化規(guī)律。
MAESTRO Z獨特優(yōu)勢
Maestro Z是全球領(lǐng)先的基于電極技術(shù)的實時細(xì)胞分析系統(tǒng)。具備最新設(shè)計的內(nèi)置測試環(huán)鏡倉以及下一代數(shù)據(jù)采集和分析軟件。Maesto Z平臺為您的要時細(xì)胞分析提供完整的解決方案。
持續(xù)的細(xì)胞監(jiān)測
并行記錄96個樣本的阻抗,就算要做長達(dá)幾周的實時記錄也毫無壓力。實驗過程非侵入、無標(biāo)記。根除染料/報告子對細(xì)胞的影響,數(shù)據(jù)可靠性無需置疑。
強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析功能
AxIS Z軟件極大地簡化了您實驗的設(shè)定、執(zhí)行和分析等各個環(huán)節(jié)。現(xiàn)在您可以全神貫注于科學(xué)本身,再也不用為數(shù)據(jù)分析發(fā)愁了。
實現(xiàn)原位檢測
無需繁復(fù)的細(xì)胞懸液制備(比如進(jìn)行流式分析時),也不必破壞貼壁細(xì)胞的網(wǎng)絡(luò)形態(tài)。Maestro Z系統(tǒng)使得高通量樣本在正常生理環(huán)境下的實時數(shù)據(jù)睡手可得。
想看到您的樣本?
有些時候,您只是想在顯微鏡下看一眼自己的細(xì)胞樣本。Maestro Z 96孔專用板的每個孔內(nèi)都設(shè)有細(xì)胞觀察窗口,方便您的操作。
精確的環(huán)境控制
另外購置一臺細(xì)胞培養(yǎng)箱?不存在的。
Maestro Z的內(nèi)置智能環(huán)境倉可以精準(zhǔn)地控制溫度和二氧化碳濃度,省下您寶貴的實驗室空間和預(yù)算。另外這種設(shè)計還能從根本上杜絕電噪音和機(jī)械震動。一舉兩得。